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慢凍：這一步驟主要是為了防止細胞在冷凍過程中形成冰晶，從而對細胞造成損害。通過緩慢降低溫度，細胞可以逐步脫水，減少胞內冰晶的形成，從而保護細胞結構不受破壞。此外，加入低溫保護劑（如DMSO）也能提高胞膜對水的通透性，降低冰點，延緩凍結過程，進一步減少冰晶對細胞的損傷。

速融：在復蘇過程中，快速融化是必要的，以防止DMSO在液體狀態下對細胞的毒害作用。快速融化能使細胞迅速進入復蘇和生長狀態，避免由于緩慢融化導致的水分滲入細胞內形成胞內再結晶，從而對細胞造成損傷。

慢凍：這一步驟主要是為了防止細胞在冷凍過程中形成冰晶，從而對細胞造成損害。通過緩慢降低溫度，細胞可以逐步脫水，減少胞內冰晶的形成，從而保護細胞結構不受破壞。此外，加入低溫保護劑（如DMSO）也能提高胞膜對水的通透性，降低冰點，延緩凍結過程，進一步減少冰晶對細胞的損傷。

速融：在復蘇過程中，快速融化是必要的，以防止DMSO在液體狀態下對細胞的毒害作用。快速融化能使細胞迅速進入復蘇和生長狀態，避免由于緩慢融化導致的水分滲入細胞內形成胞內再結晶，從而對細胞造成損傷。

細胞復蘇后只有非常少量細胞貼壁，是不是需要重新復蘇？先不要著急丟掉！可以補加血清和細胞因子，或者每隔 2-3 天換新鮮的生長培養基，經過 2-3 次換液后，大部分細胞就能看到明顯增殖，此時再按照正常傳代操作即可。

細胞復蘇后剛開始已經貼壁了狀態不錯，后面第二天開始出現死亡現象，這個情況可能是凍存前細胞消化過度，或者凍存中收凍存液殺害細胞凋亡導致的情況。